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高效液相色谱仪常规分析操作步骤与规程

点击次数:67 发布时间:2019/4/3 17:14:36 下载资料

   高效液相色谱仪操作步骤

 

  1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。

 

  2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

 

  3、打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

 

  4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

 

  5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。

 

  6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。

 

  7、设计走样方法。点击file,选取se-lect users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。

 

  8、 进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

 

  9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。

 

  10、填写登记本,由负责人签字。

 

 

 注意事项:

 

  1、流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。

 

  2、柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。

 

  3、所有过柱子的液体均需严格的过滤。

 

  4、 压力不能太大,最好不要超过2000 psi。

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